A radiação ultravioleta (UV) é uma radiação eletromagnética de baixa energia que pode matar vários microrganismos. As bactérias Gram-negativas são as mais sensíveis, seguidas pelas bactérias Gram-positivas, e os esporos são os menos sensíveis. A resistência dos esporos fúngicos é a mais forte. O efeito direto da radiação UV é inativar os microrganismos destruindo seus ácidos nucléicos e proteínas, enquanto o efeito indireto é matar os microrganismos por meio do ozônio produzido pela irradiação UV. A irradiação direta da sala de cultura para desinfecção é simples e eficaz.
O efeito de desinfecção de uma lâmpada UV está positivamente correlacionado com sua intensidade de radiação e dose de irradiação. A intensidade da radiação diminui à medida que a distância entre a lâmpada e o objeto aumenta e a dose de irradiação é proporcional ao tempo de irradiação. Portanto, a distância e o tempo de irradiação da lâmpada UV devem ser apropriados para o objeto a ser irradiado. Uma lâmpada de 30W a 2 metros acima do solo pode irradiar uma sala de 9 metros quadrados. Recomenda-se irradiar por 2 a 3 horas por dia com um intervalo de 30 minutos. O tempo de irradiação deve ser estendido se a lâmpada estiver localizada a mais de 2 metros acima do solo e o efeito de irradiação for ruim a uma distância de 2,5 metros. A distância entre a lâmpada UV e a mesa de trabalho não deve exceder 1,5 metros, e o tempo de irradiação deve ser de 30 minutos. A lâmpada UV não apenas prejudica a pele e os olhos, mas também tem efeitos adversos nas células e reagentes cultivados, portanto, a lâmpada UV não deve ser operada durante o manuseio de utensílios de cultura de células.
O método mais comum de esterilização úmida em alta temperatura é o método de autoclavagem, que tem boa capacidade de penetração de materiais biológicos e pode causar morte microbiana por desnaturação e coagulação de proteínas. Este método pode ser usado para esterilizar tecidos, vidros, utensílios de metal, produtos de borracha e certos meios de cultura.
Autoclaves diferentes atingem temperaturas diferentes, e a pressão e o tempo de esterilização eficazes necessários para diferentes itens de desinfecção são diferentes. Depois de tirar o esterilizadoUtensílios de cultura celularS (excluindo líquidos) da autoclave, eles devem ser imediatamente secos em um forno a 60 a 70 °C e armazenados para uso posterior, caso contrário, o material de embalagem úmido pode ser contaminado por microrganismos. A esterilização fervente também é um método comumente usado de desinfecção por calor úmido, que é caracterizado por condições simples e uso conveniente.
A esterilização por calor seco envolve o aquecimento de itens em um forno elétrico acima de 160 °C e mantê-los lá por 90 a 120 minutos para matar bactérias e esporos e obter a esterilização. Este método é usado principalmente para esterilizar utensílios de cultura de células de vidro (como copos grandes e garrafas de cultura), utensílios de metal, e itens que não podem entrar em contato com vapor (como pó e preparações de óleo).
Após a esterilização por calor seco, desligue o interruptor e deixe os itens esfriarem gradualmente antes de abrir o forno. Não abra o forno imediatamente para evitar mudanças bruscas de temperatura que possam causar a ruptura do vidro. Deve haver espaço entre os itens no forno, e os itens não devem estar perto do dispositivo de aquecimento. A lesão por queimadura também é um dos métodos de esterilização, que geralmente envolve o uso da chama de uma lâmpada de álcool na mesa para queimar a boca de utensílios de metal e vidros para fins de esterilização.
