A cultura celular no frasco é um consumível comum de cultura de células, usado principalmente para a cultura de várias células suspensas, garrafas de pequena capacidade também podem ser usadas para a preparação ou armazenamento de meios. Este tipo deConsumíveis de laboratório médicoÉ usado na cultura de células CHO. A célula CHO é uma linha celular transformada, obtida em 1957, que é amplamente utilizada para expressar uma proteína. Na cultura de suspensão de células CHO, o primeiro a estender a mídia (CD CHO) à temperatura ambiente, para restaurar sua temperatura à temperatura ambiente e, em seguida, transferido para o pré-aquecimento do leito de agitação de 37 °C dentro de 30 min, Líquido de reciclagem move a célula de semente SAP do tubo criopreservado sugar para a cultura de células em um frasco contendo meio de pré-aquecimento, adicionando quantidade adequada de solução nutritiva, começou a se desenvolver. Atenção deve ser dada à operação asséptica no processo de recuperação celular, e a velocidade de lise das células congeladas deve ser rápida para evitar a formação de cristais de gelo nas células de aquecimento lento e danos às células. Após 2-3 dias de cultura na cultura de células em um frasco, a densidade celular aumenta e os nutrientes são gradualmente esgotados, de modo que as células precisam ser expandidas. O volume de expansão foi calculado de acordo com a densidade celular. Quando o número de células no reator foi atingido, a cultura foi interrompida e inoculada no reator para expansão. Quando a cultura de suspensão de células CHO é realizada usando a cultura de células em um frasco, geralmente é necessário agitar regularmente com a ajuda do agitador para evitar o acúmulo de células e afetar seu crescimento e reprodução. Durante a operação, devemos prestar atenção à esterilidade para evitar a introdução de contaminação bacteriana devido à operação inadequada, o que causará efeitos adversos no crescimento celular.
A curva de crescimento celular é um método comum para determinar o número absoluto de crescimento das células e um índice importante para determinar a viabilidade celular. É também um dos parâmetros básicos das características biológicas das células cultivadas. Existem muitas maneiras de determinar a curva de crescimento celular, e a contagem por frasco de cultura de células é uma maneira comum. O método da curva de crescimento comumente usado é: nas mesmas especificações da cultura de células em uma garrafa, inoculada com a mesma quantidade de células da mesma geração, após o treinamento a cada 24 horas para tirar alguns frascos de contagens de células, para promover a abscissa denota o tempo, O número de células de registro de tempo diferente para coordenadas de fundo, marca, a linha reta em vários pontos para a curva de crescimento celular, ou seja, pode refletir a dinâmica do crescimento celular. Usando o método de contagem de frascos de cultura de células para determinar a curva de crescimento celular pode não apenas compreender os parâmetros básicos das características biológicas das células cultivadas, determinar o número absoluto de crescimento celular e avaliar a viabilidade celular, mas também pode ser usado para determinar a influência de fatores estranhos, como drogas no crescimento celular.
